"Як мы ўсе ведаем, ПЦР - гэта асноўны эксперыментальны метад у біяхімічных лабараторыях". Эксперыментальныя вынікі заўсёды нездавальняючыя, што можа быць звязана з невялікім забруджваннем пластыкавых расходных матэрыялаў для ПЦР або эксперыментальнымі перашкодамі, выкліканымі ўвядзеннем інгібітараў. Ёсць яшчэ адна вельмі важная прычына: няправільны выбар расходных матэрыялаў таксама моцна паўплывае на вынікі эксперыменту.
Прычын, якія ўплываюць на вынікі ПЦР-эксперыментаў, шмат: звычайна вылучаюць 7 відаў.
1. Праймеры: праймеры з'яўляюцца ключом да спецыфічнай рэакцыі ПЦР, а спецыфічнасць прадуктаў ПЦР залежыць ад ступені камплементарнасці паміж праймерамі і матрычнай ДНК;
2. Фермент і яго канцэнтрацыя;
3. Якасць і канцэнтрацыя dNTP;
4. Матрычная (ген-мішэнь) нуклеінавая кіслата;
5. Канцэнтрацыя Mg2+;
6. Налада тэмпературы і часу;
7. Колькасць цыклаў;
8. Абсталяванне, расходныя матэрыялы і інш.
Сярод многіх фактараў, якія ўплываюць, расходныя матэрыялы з'яўляюцца адным з вельмі важных фактараў, якія лёгка забываюць.
Ёсць шмат відаў
Расходныя матэрыялы для ПЦР: 8 прабірак, прабіркі з невялікім аб'ёмам, стандартныя прабіркі, без агароджы, з напалову ашалёўкай, з поўнай спадніцай і серыя пласцін для ПЦР і кПЦР. Вельмі цяжка выбраць, і ёсць шмат агульных праблем, давайце паглядзім на праблемы, якія кожны выбірае
Расходныя матэрыялы для ПЦР, і як іх вырашыць?
Чаму
Расходныя матэрыялы для ПЦРяк правіла, з ПП?
Адказ: Расходныя матэрыялы для ПЦР/кПЦР звычайна вырабляюцца з поліпрапілена (PP), таму што гэта біялагічна інэртны матэрыял, паверхня няпроста прыліпаць да біямалекул, і ён мае добрую хімічную ўстойлівасць і пераноснасць тэмпературы (можна захоўваць у аўтаклаве пры 121 градусе) бактэрыі а таксама можа вытрымліваць перапады тэмператур падчас цеплавога цыклу). Гэтыя матэрыялы звычайна знаходзяцца ў непасрэдным кантакце з рэагентамі або ўзорамі, таму ў працэсе вытворчасці і падрыхтоўкі неабходна выбіраць высакаякасныя матэрыялы і добрыя метады апрацоўкі.