> Блог > Навіны прамысловасці

Якія функцыі набору ELISA?

2022-12-23

Набор ELISA заснаваны на цвёрдай фазе антыгена або антыцелы і ферментнай маркіроўцы антыгена або антыцелы. Антыген або антыцела, звязаныя з паверхняй цвёрдага носьбіта, па-ранейшаму захоўваюць сваю імуналагічную актыўнасць, а антыген або антыцела, пазначаныя ферментам, захоўваюць як сваю імуналагічную актыўнасць, так і актыўнасць фермента. У момант вызначэння доследны ўзор (у якім вымяраецца антыцел або антыген) рэагуе з антыгенам або антыцелам на паверхні цвёрдага носьбіта. Комплекс антыген-антыцела, які ўтварыўся на цвёрдым носьбіце, аддзяляюць ад іншых рэчываў у вадкасці прамываннем.

Дадаюцца пазначаныя ферментамі антыгены або антыцелы, якія таксама звязваюцца з цвёрдым носьбітам шляхам рэакцыі. У гэты час колькасць фермента ў цвёрдай фазе прапарцыйна колькасці рэчыва ва ўзоры. Пасля дадання субстрата ферментнай рэакцыі, субстрат каталізуецца ферментам, каб стаць каляровымі прадуктамі. Колькасць прадукту наўпрост залежыць ад колькасці доследнага рэчыва ва ўзоры, таму якасны або колькасны аналіз можна правесці ў залежнасці ад глыбіні колеру.

Высокая каталітычная эфектыўнасць ферментаў ўскосна ўзмацняе вынікі імуннага адказу, што робіць аналіз вельмі адчувальным. ІФА можна выкарыстоўваць для вызначэння антыгенаў, але таксама можна выкарыстоўваць для вызначэння антыцелаў.

Асноўныя прынцыпы набору ІФА
Ён выкарыстоўвае спецыфічную рэакцыю антыгена і антыцелы для злучэння аб'екта з ферментам, а затым вырабляе каляровую рэакцыю паміж ферментам і субстратам для колькаснага вызначэння. Аб'ектам вымярэння можа быць антыцела або антыген.

Для гэтага метаду вызначэння неабходныя тры рэагенты:
â Цвёрдафазны антыген або антыцела (імунны адсарбент)
â¡ Антыген або антыцела, пазначаныя ферментам (маркер)
â¢ субстрат для дзеяння ферментаў (агент для праявы колеру)

Пры вымярэнні антыген (антыцела) спачатку звязваецца з цвёрдым носьбітам, але ўсё яшчэ захоўвае сваю імунную актыўнасць, а затым дадаецца кан'югат (маркер) антыцелаў (антыгена) і фермента, які ўсё яшчэ захоўвае сваю першапачатковую імунную актыўнасць і фермент дзейнасць. Калі кан'югат рэагуе з антыгенам (антыцелам) на цвёрдым носьбіце, дадаецца адпаведны субстрат фермента. Гэта значыць каталітычны гідроліз або акісляльна-аднаўленчую рэакцыю і колер.

Адценне колеру, які ён вырабляе, прапарцыйны колькасці антыгена (антыцелаў), якое трэба вымераць. Гэты каляровы прадукт можна назіраць няўзброеным вокам, аптычным мікраскопам, электронным мікраскопам, таксама можна вымераць з дапамогай спектрафатометра (прыбора для этыкеткі фермента). Спосаб просты, зручны, хуткі і канкрэтны.

Папярэдні:Увядзенне Elisa Plate

Далей:Чаму культура клетак спачатку лізіруе эрытрацыты?