> Навіны > Навіны прамысловасці

Чаму культура клетак спачатку лізіруе эрытрацыты?

2022-12-23

Асноўныя ўводзіны
Лізат эрытрацытаў - адзін з самых простых і лёгкіх метадаў выдалення эрытрацытаў, гэта значыць расшчаплення эрытрацытаў лізатам, які не пашкоджвае ядравыя клеткі і можа цалкам выдаліць эрытрацыты. Расшчапленне лізата - гэта мяккі метад выдалення эрытрацытаў, які ў асноўным выкарыстоўваецца для аддзялення і ачысткі тканкавых клетак, распыленых ферментным расшчапленнем, аддзялення і ачысткі лімфацытаў і выдалення эрытрацытаў у эксперыментах з тканкавым бялком і нуклеінам. кіслотная экстракцыя. Клеткі тканіны, атрыманыя лізатам эрытрацытаў, не ўтрымліваюць эрытрацытаў і могуць выкарыстоўвацца ў далейшым для першаснай культуры, зліцця клетак, праточнай цытаметрыі, падзелу і экстракцыі нуклеінавых кіслот і бялкоў і г.д.

Інструкцыя па ўжыванні
Узор клетак тканіны
1. Свежыя тканіны расшчаплялі падстраўнікавай залозай/ферментам або калагеназай і диспергировали ў завісь асобных клетак, а супернатант адкідвалі цэнтрыфугаваннем.

2. Вазьміце лізат ELS з халадзільніка пры тэмпературы 4°C, дадайце лізат ELS да клеткавага асадка ў суадносінах 1:3-5 (дадайце 3-5 мл лізата да 1 мл ушчыльненай клеткі), акуратна прадзьмухніце і змяшайце.

3. Цэнтрыфугуйце пры 800-1000 абаротаў у хвіліну на працягу 5-8 хвілін і выліце верхнюю чырвоную празрыстую вадкасць.

4. Асаджаную частку збіралі і цэнтрыфугавалі з растворам Хэнка або бессыроватачным культуральным растворам 2-3 разы.

5, калі ўзлом не завершаны/завершаны, можна паўтарыць крокі 2 і 3.

6. Ресуспензия клетак для наступных эксперыментаў; Калі РНК экстрагіруецца, лепш за ўсё рабіць гэта ў растворы, прыгатаваным на этапе 4 з выкарыстаннем вады DEPC

Эрытрацыты маюць вельмі кароткі жыццёвы цыкл, усяго 120 дзён, але яны вельмі хутка ўзнаўляюць кроў, і ў гэтым выпадку яны асабліва здольныя да дзялення клетак, і яны з'яўляюцца клеткамі, якія дзеляцца найбольш хутка, таму гэтая клетка вельмі каштоўная, так што гэта вельмі карысна для культуры клетак. Гэта вельмі проста, у ім няма арганэл, толькі клеткавыя мембраны і вавёркі.

Папярэдні:Якія функцыі набору ELISA?

Далей:Патрабаванні да рэагентаў і асноўнае прадстаўленне канцэнтрацыі раствора.